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蛋白質(zhì)印跡法是分子生物學(xué)、生物化學(xué)和免疫遺傳學(xué)中常用的一種實(shí)驗(yàn)方法。蛋白質(zhì)印跡法(免疫印跡試驗(yàn))即WesternBlot,其基本原理是通過特異性抗體對(duì)凝膠電泳處理過的細(xì)胞或生物組織樣品進(jìn)行著色。通過分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質(zhì)在所分析的細(xì)胞或組織中表達(dá)情況的信息。實(shí)驗(yàn)的要點(diǎn)1、樣品質(zhì)量。所抽取樣品的蛋白含量,蛋白變性是否充分等等,還有,蛋白樣品的PH值是否在7~8之間。這會(huì)直接影響到樣品濃縮的效果。此外,蛋白樣品是否降解、目的蛋白是否已抽取充分都會(huì)對(duì)終結(jié)果的可靠性有...
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一、基本理論(一)分子篩效益一個(gè)含有各種分子的樣品溶液緩慢地流經(jīng)凝膠色譜柱時(shí),各分子在柱內(nèi)同時(shí)進(jìn)行著兩種不同的運(yùn)動(dòng):垂直向下的移動(dòng)和無定向的擴(kuò)散運(yùn)動(dòng)。大分子物質(zhì)由于直徑較大,不易進(jìn)入凝膠顆粒的微孔,而只能分布顆粒之間,所以在洗脫時(shí)向下移動(dòng)的速度較快。小分子物質(zhì)除了可在凝膠顆粒間隙中擴(kuò)散外,還可以進(jìn)入凝膠顆粒的微孔中,即進(jìn)入凝膠相內(nèi),在向下移動(dòng)的過程中,從一個(gè)凝膠內(nèi)擴(kuò)散到顆粒間隙后再進(jìn)入另一凝膠顆粒,如此不斷地進(jìn)入和擴(kuò)散,小分子物質(zhì)的下移速度落后于大分子物質(zhì),從而使樣品中分子大...
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點(diǎn)火問題在分析工作中,經(jīng)常會(huì)碰到部分儀器點(diǎn)火線圈不亮,無法正常點(diǎn)火。首先要檢查點(diǎn)火爐絲是否正常,如爐絲斷則需要更換爐絲,如爐絲亮但點(diǎn)不燃火焰,就需要檢查燃?xì)饣蚩刂崎y,檢查爐絲與爐芯的位置是否合適,排除這些故障后儀器可正常點(diǎn)火。無信號(hào)強(qiáng)度在儀器檢定過程中,經(jīng)常遇到儀器測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)溶液后無響應(yīng)熒光強(qiáng)度。遇到此類問題,首先,應(yīng)該檢查靜態(tài)光源,檢查元素?zé)羰欠顸c(diǎn)亮。若儀器燈能量正常,說明儀器電路部分正常,則需要進(jìn)一步檢查反應(yīng)系統(tǒng)或原子化系統(tǒng)。檢查儀器泵管松緊是否合適,管道有無堵塞破裂。如出...
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掃描電鏡在觀察生物樣品時(shí),具有以下特點(diǎn):多角度觀察樣品的表面結(jié)構(gòu);不需要將樣品切成薄片;景深大、圖像立體感強(qiáng);放大倍數(shù)從幾十倍到幾十萬倍連續(xù)可調(diào);在觀察形貌的同時(shí)可以對(duì)微區(qū)的成分進(jìn)行定量和定性分析。而能否獲得真實(shí)、清晰、理想的掃描電鏡觀察結(jié)果,樣品的制備過程是關(guān)鍵。生物樣品含水直接觀察,會(huì)對(duì)掃描電鏡造成以下影響:1.樣品蒸發(fā)的水蒸氣遭遇高能電子束,會(huì)被電離而放電,引起束流大幅度波動(dòng),使圖像模糊,或者根本不能成像;2.大多數(shù)含水樣品在高真空中容易發(fā)生形態(tài)損傷,表面皺縮、變形;3...
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過濾的重要性過濾可以保護(hù)色譜系統(tǒng)和色譜柱,延長(zhǎng)柱子的使用壽命,改善數(shù)據(jù)的精確度。過濾可以消除由于摩擦產(chǎn)生顆粒而引起的壓力波動(dòng)和無規(guī)律的雜質(zhì)引起的基線波動(dòng)??梢韵捎跉馀荽嬖趯?duì)檢測(cè)系統(tǒng)的干擾。因此通常采用微孔濾膜(Membrane)來過濾流動(dòng)相,使用針頭濾器來過濾樣品。濾膜的相關(guān)參數(shù)1.孔徑孔徑等級(jí)是指通過在十分嚴(yán)格的測(cè)試條件下100%截留下某種特定尺寸的挑戰(zhàn)菌來區(qū)分孔徑。必須指明的條件里有:測(cè)試有機(jī)體(或分子)尺寸及濃度,測(cè)試壓力和檢測(cè)法。2.空氣通量為測(cè)量空氣通過濾器之一...
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亞沸蒸餾水器是提取高純水的全封閉石英玻璃儀器,本儀器在原單重石英亞沸高純水蒸餾器的基礎(chǔ)上增添了一組.因?yàn)榇水a(chǎn)品從蒸餾水原料進(jìn)口由一道蒸餾、二道蒸餾至出水都由它自動(dòng)完成,所以此產(chǎn)品也叫”石英雙重亞沸蒸餾水器”。石英雙重亞沸蒸餾水器在提純過程中因冷凝空間溫度高可制取無菌無熱超純水,加熱絲封閉在殼體內(nèi),接受水又不接觸空氣,整個(gè)提純過程不受環(huán)境污染。儀器為園筒形,臥式標(biāo)準(zhǔn)磨口全封閉石英玻璃儀器系統(tǒng)。它由兩只提純器、一只石英儲(chǔ)水瓶和儀器外殼工作架等四部分組成。亞沸蒸餾水器用高純石英為基...
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高效毛細(xì)管電泳(highperformancecapillaryelectrophoresis,HPCE)是近年來發(fā)展起來的一種分離、分析技術(shù),它是凝膠電泳技術(shù)的發(fā)展,是高效液相色譜分析的補(bǔ)充。該技術(shù)可分析的成分小至有機(jī)離子、大至生物大分子如蛋白質(zhì)、核酸等。可用于分析多種體液樣本如血清或血漿、尿、腦脊液及唾液等,HPLC分析高效、快速、微量。電泳遷移不同分子所帶電荷性質(zhì)、多少不同,形狀、大小各異。一定電解質(zhì)及PH的緩沖液或其它溶液內(nèi),受電場(chǎng)作用,樣本中各組分按一定速度遷移,從...
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酸純化器利用熱輻射原理,保持液體溫度低于沸點(diǎn)溫度蒸發(fā),再將其酸蒸氣冷凝從而制備高純水和高純?cè)噭?,廣泛應(yīng)用于樣品處理及分析實(shí)驗(yàn)中。酸純化器優(yōu)勢(shì):1、密閉環(huán)境下提純酸,不受環(huán)境污染,確保酸純度;2、節(jié)約成本、方便實(shí)驗(yàn):較短時(shí)間內(nèi)純化低成本的酸試劑以達(dá)到痕量分析要求;3、可以滿足ICP、ICP-MS極低的檢測(cè)限需要及苛刻的分析應(yīng)用中提供實(shí)驗(yàn)室級(jí)超純酸,所用容器均采用Teflon耐腐蝕無吸附塑料,可處理如HNO3、HCl、HF等實(shí)驗(yàn)室的常用酸;4、實(shí)驗(yàn)證明將金屬雜質(zhì)含量約10ppb的...
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